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Tipo do documento: Dissertação
Título: Análise das proteínas glicosiladas secretadas pelo isolado trichoderma harzianum (ALL-42) induzida por parede celular de fitopatógenos
Autor: Naoum, Stéphanie 
Primeiro orientador: Monteiro, Valdirene Neves
Primeiro membro da banca: Georg, Raphaela de Castro
Segundo membro da banca: Almeida, Fausto Bruno dos Reis
Resumo: As glicoproteínas são moléculas formadas pela união de proteínas à glicanos por um processo pós-traducional denominado glicosilação. Este processo é realizado nos mais variados tipos celulares, entre eles a célula fúngica, e as glicoproteínas produzidas por estas células possuem papéis biológicos essenciais à vida. Trichoderma harzianum (ALL-42) é um fungo muito estudado devido ao seu papel de biocontrole e indução de crescimento vegetal. Estudos envolvendo substâncias produzidas por este microrganismo podem colaborar para o entendimento deste mecanismo. O objetivo principal deste trabalho foi identificar e analisar as proteínas glicosiladas secretadas pelo T. harzianum quando induzido por meio de cultura contendo paredes celulares de diferentes fitopatógenos. Os secretomas produzidos para as paredes de Sclerotinia sclerotiorum e Fusarium oxysporum foram então submetidos à cromatografia por afinidade Concanavalin A e posteriormente realizada a eletroforese SDS-PAGE e coloração por Pro-Q Emerald 488 para identificação de glicoproteínas. As bandas apresentadas no gel foram recortadas e submetidas à espectrometria de massa. Os resultados demonstraram a presença de algumas proteínas como galactose oxidases, glicosídeo hidrolases, β-1,3-exoglucanases e proteases, com funções enzimáticas importantes no mecanismo de degradação de parede celular de fitopatógeno e a presença destas proteínas coincide com resultados obtidos em outros estudos. As amostras demonstraram atividade enzimática para sete substratos testados, escolhidos de acordo com as enzimas identificadas por espectrometria de massas e análise da expressão gênica relativa. Os genes relacionados a estas proteínas identificadas no glicosecretoma foram encontrados em maior expressão quando T. harzianum (ALL-42) foi crescido com as paredes de fitopatógenos em relação a duas outras situações, crescido em glicose e em glicerol, como fontes de carbono.
Abstract: Glycoproteins are molecules formed by the union of proteins to glycans by a post-translational process called glycosylation. This process is carried out in a variety of cell types, including fungal cell and the produced glycoproteins have biological roles essential for life. Trichoderma harzianum (ALL-42) is a fungus widely studied due to its role of biocontrol and plant growth induction. Studies involving substances produced by this microorganism may contribute to the understanding of this mechanism. The aim of this study was to identify and analyze the glycosylated proteins secreted by T. harzianum when grown in culture medium containing cell walls of different pathogen. The secretomas produced for walls of Sclerotinia sclerotiorum and Fusarium oxysporum were then subjected to Concanavalin A affinity chromatography and subsequently carried to SDS-PAGE electrophoresis and staining with Pro-Q Emerald 488 for identifying glycoproteins. The bands displayed in the gel were cut out and subjected to mass spectrometry. The results showed the presence of some proteins, galactose oxysdases, glycoside hydrolases, β-1,3-exoglucanases e proteases, with important functions in enzymatic cell wall degradation mechanism of pathogen and the presence of these proteins coincides with results from other studies. The samples showed enzymatic activity for seven substrates tested, chosen in accordance with the enzymes identified by mass spectrometry and analyzing the relative gene expression. Genes related to these proteins were identified in glicosecretoma found in higher expression as T. harzianum (ALL -42 ) was grown on the walls of plant pathogens compared to two other situations , grown in glucose and glycerol as carbon sources.
Palavras-chave: Glicoproteínas
Secretoma
Trichoderma harzianum
Enzimas
Parede celular.
Glycoproteins
Secretome
Trichoderma harzianum
Enzymes
Cell wall
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Estadual de Goiás
Sigla da instituição: UEG
Departamento: UEG ::Coordenação de Mestrado em Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde
Programa: Programa de Pós-Graduação Stricto sensu em Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde (PPG-CAPS)
Citação: NAOUM, Stéphanie. Análise das proteínas glicosiladas secretadas pelo isolado trichoderma harzianum (ALL-42) induzida por parede celular de fitopatógenos. 2016. 67 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde) - Câmpus Central - sede: Anápolis - CET, Universidade Estadual de Goiás, Anápolis.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://www.bdtd.ueg.br/handle/tede/323
Data de defesa: 30-Mar-2016
Appears in Collections:Mestrado Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde

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